Мультик рассказывает о жизни старшеклассника Питера Паркера, который в один день получает свои суперспособности и становится Человеком-пауком. Питер балансирует между своей повседневной жизнью, учебой, друзьями и семьей, и своей супергеройской деятельностью, борясь со злом и защищая жителей Нью-Йорка. Каждый эпизод сериала представляет собой отдельную историю, но также продвигает основной сюжет сериала, связанный с загадочным Краулером - новым противником Человека-паука, который скрывает свою личность и поджидает своего героя на каждом шагу. В сериале представлены все знакомые персонажи из комиксов Марвел, такие как Гарри Осборн, Мэри Джейн Уотсон, Дж. Дж. Джеймсон и другие. Каждый персонаж имеет свою уникальную личность и свойственные ему черты характера.